实验技巧

Nature论文险因动物伦理被撤稿,你的动物实验合乎动物福利和伦理吗?

2017-01-12

前几期我们一直在介绍动物实验,从人道关怀的角度,实验动物为人类健康做出了极大的牺牲,理应享有应得的福利,得到我们的善待。我们本期的内容就是:实践中的实验动物福利和伦理。


导语

前面几期关于实验动物的文章,和大家分享了科学研究中常用的动物模型(基因编辑鼠的构建和常见疾病动物模型),相信大家已有所斩获。而每每想起那些为人类健康背负痛苦和做出牺牲的可爱的实验动物们,小编在觉肃然起敬的同时,也不禁地问自己,那我们到底该怎样地去善待它们呢?在具体实践中,怎样才是合乎动物福利和伦理的呢?这就是我们本期学习的内容。

 

1966年,美国制定《实验室动物福利法》,“动物福利”、“动物伦理”等字样开始流行,进入人们的视野。现在很多有动物实验需求的高校和研究所都开设了动物实验相关专业课程,绝大部分的科研人员在动物实验之前,也都会有一段时间的包括动物福利和伦理在内的专业学习,但实际上我们学到的往往都是要保障实验动物“不受饥渴的自由”“生活舒适的自由”“不受痛苦伤害的自由”“生活无恐惧和悲伤感的自由”“表达天性的自由”等这样一些笼统而宽泛的概念,而对哪些具体的行为有可能违反动物实验伦理或者引发争议却并不清楚。即便是知名的学者和发表在顶级期刊上的论文,有时也会在这个问题上犯迷糊。

2011年,来自麻省理工学院、哈佛医学院和Broad研究所的研究人员在《Nature》杂志发表了题为《Selective killing of cancer cells by a small molecule targeting the stress response to ROS》的研究论文,报告称证实一种叫做荜茇酰胺(piperlongumine)的小分子可以选择性杀死小鼠体内的癌细胞。2015年9月,《Nature》发布勘误表,以该研究中某些小鼠体内的肿瘤体积超出允许的最大直径1.5厘米为由,撤销了论文中的部分数据,而率先提出这一问题的科学家则更是认为这篇论文应该被撤稿,并表示对于这样的情况能够在同行评议系统中蒙混过关感到惊讶。最后事件以论文作者向公众道歉,《Nature》杂志社要求以后涉及动物实验的论文需作者列出动物使用委员会所允许的最大肿瘤尺寸,并且声明这一尺寸不会在试验期间被超过而告结束。

从人道关怀的角度,实验动物为人类健康做出了极大的牺牲,理应享有应得的福利,得到我们的善待;从更为实际的学术研究的角度,如果是等到科研成果投稿,甚至是成果发表以后,被编辑或同行质疑违背动物伦理,那就是一件比较悲伤和尴尬的事情了。

因此,笔者就参考美国国立卫生院(NIH)网站提供的文本《ARENA/OLAW IACUC Guidebook, 2002》[1],从动物福利和伦理实践角度,和大家探讨作为动物实验设计者和具体执行者该如何来做。

1、安死术

定义:以一种不会带来明显的疼痛和悲伤,并能快速丧失意识随后死亡的方式人道地结束动物的生命。

在具体实践中,分为:

①可接受方法(Acceptable);

②附有条件地可接受方法(Conditionally Acceptable);

③不可接受方法(Unacceptable)。

其中附有条件地可接受方法只有在应用于深度麻醉的动物才是可接受的。一些安死术,如KCL注射或心脏内福尔马林灌注只有在全身深度麻醉时才可以被接受。详细如下:

可接受方法:

a. 巴比妥酸盐(大部分物种)

b. 二氧化碳窒息(大部分物种)

c. 吸入式麻醉(大部分物种)

d. 微波辐照(小鼠和大鼠)

e. 硫酸三卡因甲烷(鱼类,两栖类)

f. 苯佐卡因盐酸盐(鱼类,两栖类)

g. 击晕用棒(马,牛,猪)

h. 乙醚和一氧化碳可适用于大多数物种,但对人员相对危险

附有条件地可接受方法(需动物实验管理小组同意):

a. 颈椎脱位法(鸟类,小型啮齿类和兔)

b. 斩首(鸟类,啮齿类,一些其他物种)

c. 脑脊髓刺毁法(一些变温动物)

d. 一些药理学和物理方法

不可接受方法:

a. 水合氯醛,氯仿和氰化物

b. 减压

c. 神经肌肉阻滞剂

d. 一些药理学和物理方法

e. 干冰-二氧化碳窒息

2、人道终点

定义:尽早结束实验以避免或终止无法避免的动物疼痛或痛苦的标准被称为人道终点,其一个重要的特征在于即使提早结束实验仍然能够达到实验设计的目的。

理想化的状态是能够被用于在动物感到疼痛或痛苦之前结束研究。在实践中,我们应该知晓不同实验终点对应的特征并选择合适的人道终点来减少动物的疼痛或痛苦。

举例如下:

 

 

3、最小化疼痛和痛苦

定义:指导手册要求在审查所有的实验方案时,均要确保实验动物的疼痛和痛苦是最少。

所有的实验方案均要包括如下说明:

1、采用适当的镇静,痛觉缺失和麻醉等措施;

2、指定介入标准以便在达到预期实验效果的情况下及时结束实验或安乐死实验动物;

3、制定详细的术后护理方案。手册同时还列举出可能引起疼痛或痛苦的因素,包括:身体约束,手术,食物或饮用水约束,以死亡作为实验终点,伤害性刺激,皮肤或角膜刺激性测试,肿瘤负荷,心脏或眼眶取血,异常环境条件等。

这要求我们在设计实验室,应该充分考量这些因素,对可能引起实验动物疼痛或痛苦的不必要措施应坚决排除。此外我们也应该去学着通过行为来评估动物的疼痛和痛苦。

结语

实验动物福利和伦理中,无论理论还是实践,诸如实验动物的应用为人类的发展到底有多大的贡献;重复别人的实验是否一定要用实验动物;实验中所选择动物的品种、品系、年龄、体重、性别等如何适应科学研究需要;实验设计如何最大限度地减少动物的痛苦和伤害;在饲养、运输过程中如何给予实验动物足够的生活环境等,都是我们在动物实验中需要注意的重要事项。

我们期望,实验动物不再成为实验材料那一天的到来,但在可预见的未来,这些可爱的精灵们还将继续为人类奉献和牺牲。而我们能做的,就是善待实验动物,善待生命,善待我们自己。

参考文献


[1]《ARENA/OLAW IACUC Guidebook, 2002》由应用研究伦理协会(Applied Research Ethics National Association, ARENA)和实验动物福利办公室Office of Laboratory Animal Welfare, OLAW)合编。其中Applied Research Ethics National Association 是一个旨在为伦理委员会(IRB)和动物实验管理小组IACUC等提供伦理指导意见的非盈利机构;Office of Laboratory Animal Welfare则是一个NIH的独立外设机构,主要为美国公共卫生署提供实验动物使用和人道关怀的政策指导和解释,并监督公共卫生署基金所支持科研项目中动物的使用和人道关怀。

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